Состав набора:
-
АСО-латексный реагент – суспензия частиц полистирольного латекса с нанесенным на них стрептолизином-О; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и бесцветную прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость. Чувствительность АСО-латексного реагента откалибрована относительно международного стандарта (ВОЗ).
-
Физиологический раствор (ФР) – 0,9 % раствор натрия хлорида; содержит консервант — азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная жидкость
-
Положительная контрольная сыворотка (К+) — жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течении 1 ч, содержащая АСО в концентрации более 200 МЕ/мл, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная или от желтоватого до красно-коричневого цвета жидкость.
-
Отрицательная контрольная сыворотка (К–) — жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течении 1 ч, содержащая АСО в концентрации менее 150 МЕ/мл, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС, содержит консервант – азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная или желтоватого цвета жидкость.
- Шейкер орбитальный (любой марки с амплитудой колебаний 10-20 мм).
- Градуированные пипетки 2 класса точности или дозаторы пипеточные.
- Микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 20 мкл).
- Палочки стеклянные или пластиковые.
- Часы или таймер
- Используется свежеполученная сыворотка крови.
- Использование в качестве образцов плазмы крови не допускается.
- Забор крови должен быть произведен согласно стандартной процедуре.
- Допускается хранение образцов 7 дней при 2-8 ˚С или 3 месяца при температуре минус 20 ˚С.
- Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.
- Исследуемая сыворотка должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц.
- Образцы, содержащие осадок, перед анализом должны быть отцентрифугированы в течении 10-15 мин при 2,5-3,0 тыс. об/мин
- Не использовать гемолизированные или загрязненные образцы.
-
Нанести на карточку для постановки реакций (первую ячейку карточки) 20 мкл К+, рядом, с интервалом 2-3 см (на соседнюю ячейку) – 20 мкл К–.
На оставшиеся ячейки нанести по 20 мкл исследуемых образцов.
- Легким встряхиванием флакона перемешать АСО-латексный реагент и внести по 20 мкл его в каждую ячейку с образцом.
- Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) тщательно перемешать каждую каплю (распределить реакционную смесь по всей площади ячейки).
- Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).
-
Покачивать карточку в течение 2 минут, после чего сразу произвести учет результатов реакции.
- В пробирках или лунках планшета развести исследуемую сыворотку физиологическим раствором 9 г/л в соотношениях (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7 и 1:8), для чего к 10 мкл сыворотки добавить 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70 и 80 мкл физиологического раствора, соответственно.
- При необходимости число разведений можно увеличить.
- Нанести по 20 мкл каждого разведения в соответствующие ячейки карточки.
- Легким встряхиванием флакона перемешать АСО-латексный реагент и добавить по 20 мкл в каждую ячейку с разведением, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.
- Покачивать карточку в течение 2 минут, после чего произвести учет результатов реакции.
-
При более позднем учете могут быть получены искаженные результаты за счет неспецифической агглютинации частиц.