Набор реагентов для окраски на автоматических устройствах окраски мазков крови и костного мозга типа Hema-Tek. Материал должен
быть свежесобранным. Срок хранения не более 2 часов. Препараты, приготовленные из исследуемого материала, могут храниться
3 – 5 дней при комнатной температуре.
Принцип метода:
Форменные элементы окрашиваются красителями, входящими в состав набора, в соответствии с морфологическими особенностями.
Исследуемый материал:
Мазки крови или костного мозга.
Приготовление промывочного раствора:
Для приготовления промывочного раствора концентрат промывочного раствора развести дистиллированной водой до 1000 мл.
Буферный раствор и фиксатор по Май-Грюнвальду готовы к использованию.
Приготовление мазков крови и костного мозга:
1. 2-3 мазка крови (или костного мозга) сделать на предметных стеклах с помощью более узкого предметного шлифованного стекла
следующим образом.
2. На сухое предметное стекло, ближе к короткой стороне наносят пипеткой небольшую каплю крови.
3. Предметное стекло следует держать на столе или в левой руке за узкие края.
4. Правой рукой приставить шлифованное стекло узким краем к стеклу с кровью слева от капли под углом 45° и продвинуть его вправо
до соприкосновения с каплей крови.
5. Выждать до тех пор, пока кровь расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением провести
его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля.
6. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна так, чтобы весь мазок помещался на стекле, не доходя 1 - 1,5 см до его края.
7. Нельзя сильно нажимать на стекло, так как многие клетки крови могут оказаться поврежденными.
8. Хорошо сделанный мазок тонок, имеет желтоватый цвет и оканчивается “метелочкой”.
9. После приготовления мазки следует быстро высушить на воздухе до исчезновения влажного блеска.
10. При медленном высыхании может изменяться морфология клеток.
Проведение анализа:
Окраска препаратов. Фиксатор, буферный раствор и промывочный раствор, приготовленный, как описано выше, залить в емкости,
прилагаемые к автоматическому устройству типа Hema Tek и использовать согласно инструкции, прилагаемой к аппарату.
После проведения окраски микроскопировать с иммерсионной системой.
Результаты окраски:
Эритроциты: розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые.
Тромбоциты: розово-фиолетовые или фиолетовые.
Нейтрофилы: ядра – фиолетовые; цитоплазма – розово-серая или бледно-розовая; зернистость – фиолетовая или красно-фиолетовая.
Базофилы: зернистость – фиолетовая.
Эозинофилы: зернистость – оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая.
Лимфоциты: ядра – фиолетовые; цитоплазма – голубая, серо-голубая или сине-голубая.
Моноциты: ядра – фиолетовые; цитоплазма – серо-голубая.